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談談實驗室脫水離心機高速離心的工作原理和特點
實驗室高速脫水離心機差速離心是采用逐漸增大離心力的方法來達到使樣品溶液中的各種成分沉降分離的目的。具體操作步驟是:首先在離心管中盛滿同質均一的樣品溶液,設定速度時間離心後溶液會分成上清液和沉澱物兩部分;去掉一次離心的沉澱物,增大離心力繼續離心上清液以沉積所需的離子。值得注意的是,兩次離心的時間都必須選擇得當才能達到所需的分離純度。
相對而言,差速離心的操作更為簡單,而密度梯度離心的分離純度更高。脫水離心機密度梯度離心法能達到很好的分辨率,它能使溶液中所有的組份分離。密度梯度分離通常有速率區帶法(ratezonal)和等密度離心法(isopycnic)兩種。前者的依據是溶液中不同粒子的尺寸大小和沉積速度不一,而後者的依據是不同粒子的密度不同。
采用密度梯度分析法離心時,梯度形狀至關重要。線性梯度(lineargradient)是常用的。它可以用來分離蛋白質、酶和植物病毒等,等速型梯度(constantspeedgradient)適用於分離脂蛋白;分離整細胞和亞細胞采用的則是階梯型梯度(stage-wisegradient)。
采用密度梯度分析法離心後,區帶樣品的回收方法也是多樣可選的。常用的有以下四種:穿刺法、虹吸法、加壓法和切割法。